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一步法RT-PCR反轉試劑盒簡介

更新時間：2013-01-06      瀏覽次數(shù)：3125

 

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備注：本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗

產(chǎn)品名稱 :
 一步法RT-PCR反轉試劑盒
品牌 :
 BIOMIGA
貨號 :
 RT0213-01
規(guī)格 :
 20次/50次/100次
詳細信息 :
 
產(chǎn)品簡介
 
一步法RT-PCR試劑盒是為從總RNA或mRNA中特異性的反轉和擴增目的RNA而設計的。該系統(tǒng)在一種優(yōu)化反應體系中共用MMLV反轉錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶的預混液，能夠檢測長達4.0 kb的RNA目的片段?？俁NA的用量可從0.01 pg到2 μg之間，該試劑盒為50 μl的反應體系。
 
試劑盒組分

產(chǎn) 品
RT0213-00
RT0213-01
RT0213-02
RT0213-03
Reactions
5
20
50
100
Enzyme mix: MMLV RT/ Hot start Taq Mix
5 μL
20 μL
50 μL
100 μL
2× Reaction mix （optimized bμffer contains dNTP and Mg2+）
125 μL
500 μL
1.25 mL
2×1.25 mL
5 mM Magnesiμm Sμlfate
125 μL
500 μL
1.0 mL
2×1.0 mL
dd H2O
150 μL
600 μL
1.5 mL
2×1.5 mL

保存條件
 
該試劑盒-20°C保存，在此條件下可保存二年。
 
產(chǎn)品特點
 
方便的一管式設置
*的RT-PCR緩沖液及性
高度敏感性、特異性及重復性
 
推薦RT-PCR反應體系
 
建議用如下組成配制RT-PCR反應起始液：
組分
50 μl 體系
終濃度
2× Reaction mix
25 μL
1×
Enzyme mix
1.0 μL
 
Forward Primer （10 μM）
1.0 μL
200 nM
Reverse Primer （10 μM）
1.0 μL
200 nM
RNA template
× μL
Variable （0.01pg - 2μg）
Final Volμme （μL）
50 μL
用dd H2O補足50 μL體系
*如有必要，鎂鹽濃度可進一步優(yōu)化。
1．將反應溶液在冰上解凍。
2．按下列熱循環(huán)程序進行反應，以便cDNA合成之后立刻進行PCR擴增。
     cDNA合成: 1 cycle: 40–50°C for 10 min
      變性: 1 cycle: 94°C for 2 min
      PCR 擴增: 40 cycles:
                     94°C for 15 s
                     55-65°C for 30 s
                     68°C for 1 min/kb
3．用凝膠電泳檢測RT-PCR擴增產(chǎn)物。